实验

1.试剂及仪器

1.1试剂：Fmoc-Rink树脂、Fmoc保护氨基酸、苯甲硫醚、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、苯甲醚、N-甲基吡咯烷酮（NMP）、三氟乙酸(TFA)、苯酚、碘、茚三酮等。

1.2仪器：电子天平、电热恒温水浴振荡器、高速冷冻离心仪，真空旋转蒸发仪。

2.操作步骤

Scheme 3-7 General synthetic route of coumarin modified conjugates

2.1合成方法一：将马来酸酐(1.2equiv)与12-氨基十二酸(1.0 equiv)溶于冰醋酸中，放入超声仪中超声片刻，等待溶解后，进行120多摄氏度回流反应。接着等待薄层板检测反应结束后，使反应液冷却至室温，加入大量去离子水，用乙酸乙酯萃取三次，每次20毫升。合并上层萃取液，并且使用饱和食盐水洗3次，最后用无水硫酸钠进行干燥。第二天把萃取液真空旋干得到粗品，粗品用柱层析分离得到纯品。

马来酰亚胺基十二酸的合成

 使用方法一，12-氨基十二酸(0.65g，3mmol)与马来酸酐在10毫升醋酸中进行回流反应，时间为5-6小时,源)自(751+文=论]文]网[www.751com.cn，柱层析分离后得到黄色纯品，质量为0.72g，收率80%，mp91-93摄氏度。

2.2 合成方法二：将7-羟基香豆素 (1.0equiv)与不同碳链长度的马来酰亚胺连接臂(1.0 equiv)溶于CH2Cl2中，加入DMAP(0.015 equiv)，将EDC.HCl(1.2 equiv)溶于CH2Cl2中，缓慢滴加并且保证是在冰浴的条件下，接着反应液室温搅拌，过夜后薄层板检测反应结束，反应液分别用饱和Na2HCO3，HCl1M，饱和食盐水分别洗三次，无水Na2SO4干燥过夜，反应液真空旋干之后得到粗品，粗品柱层析分离得纯品(石油醚/乙酸乙酯)