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生物转化法制备天然香料丙位癸内酯的初步研究(6)

时间:2017-02-21 13:17来源:毕业论文
2 0.25 1 0.4 28 3 0.5 2 0.7 32 2.2.4.- 癸内酯萃取 萃取是通过溶质在两个液相之间的竞争性溶解(分配)而实现的。因而,溶液中物质的溶解作用是必需的,也是溶剂


2    0.25    1    0.4    28
3    0.5    2    0.7    32
2.2.4.γ- 癸内酯萃取
  萃取是通过溶质在两个液相之间的竞争性溶解(分配)而实现的。因而,溶液中物质的溶解作用是必需的,也是溶剂萃取技术开发过程中溶剂选择的前提。合适的有机溶剂是溶剂萃取能否成功的关键,一个良好的溶剂应该满足如下条件:1)有很大的萃取容量,即单位体积的萃取溶剂能萃取大量的产物;2)有良好的选择性,理想的情况是只萃取产物而不萃取杂质;3)与被萃取的液相(如水相)互溶度要小,且粘度低,界面张力小或适中,有利于相的分散和两相分离;4)溶剂的回收和再生容易;5)化学稳定性好,不易分解,对设备腐蚀性小;6)经济性好,价廉易得;7)安全性好,闪点高,对人体无毒或毒性低。
  通过翻阅参考文献[13]得到的数据,γ- 癸内酯在苯和正己烷中的含量最大,提取率都可以达到80%左右。对比两者,根据上述的参考原则,苯有毒性,导致操作性不强,正己烷在此方面优于苯,而且根据正己烷,苯,乙醇的介电常数可知正己烷和乙醇-水的互溶度较小(苯:0.178%   正己烷:0.00095%),因此,本次实验采用正己烷作为萃取剂。
萃取方法:
抽取1ml发酵液,加入正己烷,在室温下进行萃取,4000r/min振荡混匀lmin,离心分离15000r/min,15min,吸出上清液并用0.22μm的微孔滤膜过滤,留存。

2.2.5γ- 癸内酯定量检测
  气相色谱检测法:
(1)对照样品
  取0.l ml用化学方法制取得γ- 癸内酯,溶于9 ml正己烷中,混匀。从中取0.lml溶于9.9ml正己烷中,得到0.01%浓度的标样。
(2)仪器和工作条件
 GC检测γ- 癸内酯的条件:HP-5柱(30 m x 0.32 mm x 0.25μm,)载气为高纯氮气,流速为0.8mL/min。分流比为10:1,采取程序升温方式,40℃到170℃段以20℃/min升温,170到180以2℃/min升温,180到280以10℃/min升温,进样口温度为250℃,氢火焰离子检测器(FID)检测温度为300℃,进样体积为1微升,γ- 癸内酯在177℃出峰
3实验结果与讨论

3.1菌种筛选
 3.1.1菌种初筛
  菌种的优良与否对发酵结果有着直接的影响,将17种市售的干酵母粉作为目标。通过发酵实验得到GDL产量见表3.1.1和图1:
表3.1.1 17种干酵母粉初筛GDL产量
菌种代号    峰面积    GDL浓度(mg/L)    菌种代号    峰面积    GDL浓度(mg/L)
1    5.3    12.6    10    11.4    27.2
2    12.4    29.6    11    10.9    26
3    5.7    13.6    12    5.7    13.6
4    25.5    60.8    13    1.9    4.5
5    16.8    40.1    14    4.7    11.2
6    27.1    64.6    15    4.5    10.7
7    23.9    57    16    5.4    12.9
8    5.2    12.4    17    9.5    22.6
9    0    0            
(注:气相标样浓度 900mg/L;标样峰面积 377.5)           生物转化法制备天然香料丙位癸内酯的初步研究(6):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_3174.html
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