1.1.3仪器与设备

DHG-9070A型真空干燥箱 上海精宏实验设备公司；万能粉碎机 浙江屹立公贸有限公司；BS110S型电子天平 德国赛多利斯公司；超纯水机 美国密理博公司；5418型离心机 德国Eppendorf公司；HH型电热恒温水槽 金坛荣华仪器制造公司；Synergy II型多功能酶标仪 美国Biotek公司；源`自·751.文/论:文'网,www.751com.cn

1.2 实验方法

1.2.1金丝菊多糖的提取

大小两种金丝菊经粉碎机粉碎成粉，称取20g粉末加入500ml去离子水，放入水浴锅中，在85℃下水浴3h，从水浴锅中取出后进行过滤，过滤完成后加入无水乙醇，且乙醇的含量占总体积的70%，室温放置2h，随后放入离心机，6000 r/min 离心30min，弃上清，取管底沉淀，该沉淀物即为金丝菊多糖，室温挥发干燥备用。

1.2.2 清除羟基自由基（-OH）的测定

     采取邻二氮菲-Fe2+氧化法[13]。

（1）将1.0 mL 5 mmol/L邻二氮菲溶液，3.8 mL PBS缓冲液（pH 7.4）和1.0 mL不同浓度的菊花多糖溶液加入反应小瓶中，用枪头充分混匀；

（2）向上述小瓶中加1.5 mL 5 mmol/L硫酸亚铁溶液，充分混匀；

（3）继续加1.0 mL浓度为0.1%的过氧化氢溶液，加水至10 mL，37 ℃水浴中保持30 min；

（4）将上述反应液在536 nm下测定吸光度，为A样；按上述操作，不加双氧水处理为未损伤管，为A未损；不加紫苏多糖溶液为损伤管，为A损。以抗氧化剂Vc为阳性对照。按下式计算•OH清除率：