谷氨酸脱氢酶虽然广泛存在于动植物以及微生物体内[16]，但就其实际生产应用而言，还存在着有效酶源窄，国内主要依赖进口，成本高，价格昂贵，因此本课题从原材料更广泛的双孢菇和鸭肝着手，进行提取谷氨酸脱氢酶的尝试，如果成功，便可大大的缩减成本。特别是鸭肝，是鸭体内重要的解毒和营养器官，里面含有丰富的营养物质和各种生物活性物质，是提取谷氨酸脱氢酶的理想原材料。同时在实验中所用来处理动物组织提取物的聚乙二醇——硫酸铵法也有较大的实用价值，与常见的丙酮脱脂法相比，操作简单，对酶活还有保护作用。64761

现在对谷氨酸脱氢酶的提取对象大致可分为细菌和动物组织。前者利用谷氨酸发酵工业上应用的产黄色短杆菌GDK-9中克隆的谷氨酸脱氢酶GDH基因，并用它构建了穿梭载体pXMJ19-GDH[10]，这为对谷氨酸脱氢酶的理论研究和生产实践奠定了基础。另外还有谷氨酸棒杆菌对于动物组织论文网，主要有猪肝[13]、鸭肝和牛肝等，从这些组织中提取谷氨酸脱氢酶均已有报道，但从原材料来源的广泛程度来看，鸭肝应该最具前景，如能建立高效、简单的提酶工艺，实用价值会较大。

参考文献

[1]王燕，宋香，杨平平，等.谷氨酸产生菌S9114中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质[J].食品与发酵工业，2003，11(29):5-9.

[2]Baars JJP, Op den Camp HJM, van der Drift C, Van Griensven LJLD.NAD+-dependent glutamate dephydrogenase of the edible mushroom Agaricus bisporus: biochemical and molecular characterization[J].Mol Gen Genet,1990,261:452-462.

[3]Baars JJP, Op den Camp HJM, van der Drift C, Sonnenberg ASM, Van Griensven LJLD A review of primary nitrogen metabolism in Agaricus bisporus[J],Cult Mush Res Newslett ,1996,3:1-15.

[4]刘兰英，张应玖，杨平，等.谷氨酸脱氢酶的制备工艺及稳定性研究[J].中国医药工业杂志，1993，24(9).

[5]朱鸿，李想韵，王松，等.鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究[J].食品科学，2010，31:19-231.

[6]张玉姣，唐乾，曹洪玉，郑学仿.分子拥挤条件下生物大分子性质研究[J].中国生物工程杂志，2012，32(12):104-109.

[7]McPie P, Ni Y S, Minton A P. Macromolecular crowding stabilizes the molten globule form of apomyoglobin with respect to both cold and beat unfolding. J Mol Biol,2006,361(1):7-10.

[8]李宏君，伊际彤，杨启东.细胞破碎方法简述[J].黑龙江医药，2002，15（2）：124.

[9]孟琳，田景振.动物组织蛋白提纯方法的研究进展[J].食品与医药，2009,11-05.

[10]邓培生，刑晨光，谢希贤，等.谷氨酸脱氢酶的克隆及原核表达[C].全国氨基酸技术交流研讨会•论文集，2008.

[11] Frédéric Dubois, Thérèse Tercé - Laforgue, Maria -Begona Gonzalez - Moro, et al . Glutamate dehydrogenase in plants: is there a new story for an old enzyme [ J ].

Plants Physiology and Biochemistry, 2003, 4: 565～576.

[12]乐薇，陆志强.双水相体系萃取木瓜蛋白酶的研究[J].化学与生物工程，2011，28（2）

[13]顾雅君，孙淑琴.从猪肝中提取谷氨酸脱氢酶[J].河北省科学院学报，1991，03.

[14]Jams A Olsen, Chsistian B Enfinsen.The crystallizationand characterization of L - glutamic acid dehydrogenase[J ]. J. Biol . Chem, 1952, 197: 67～80.

[15]Adachi K, Suzuki I. Purification and properties of glutamate synthase from Thiobacillus thioparus. J Bacteriol,1977.129(3):1173-1182.

[16]王燕，宋香，杨平平，等.谷氨酸生产菌S9114中的谷氨酸脱氢酶的研究[J].生物工程学报，2003,11:19-6.