2  材料与方法

2.1  材料

2.1.1  菌株

所用菌种为由本实验室保藏的外切葡聚糖酶重组马克斯克鲁维酵母

2.1.2  主要仪器及设备

250mL锥形瓶、试管、橡皮管、橡皮塞、酒精灯、管子、比色皿

2S-75HJ型高压灭菌锅：江阴滨江医疗设备有限公司

高速冷冻离心机HR21M：湖南赫西仪器设备有限公司

HD-930型组合式全温摇床：太仓市博莱特实验仪器厂

SW-CJ-IFD型单人单面净化工作台：苏州净化设备有限公司

HD-930DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱：上海精宏实验设备有限公司

电子天平BS210S：北京赛多利斯天平有限公司

ZF1-I多功能紫外分析仪：上海汗诺仪器有限公司

HH-S恒温水浴锅：金坛市亿通电子有限公司

FM-50型雪花制冰机：上海比郎仪器有限公司

EPED-E2-10TF纯水仪：南京易普易达科技发展有限公司

2.2  主要试剂

1、DNS：19.8g氢氧化钠和3,5-二硝基水杨酸溶于1416mLddH2O溶液，等充分溶解后再加入306g酒石酸钾钠、7.6mL苯酚（50℃熔化）、8.3g偏重亚硫酸钠，避光保存。

2、5mmol/L 乙酰胺：称量2.95g 乙酰胺溶于10mL的ddH2O中，过滤除菌，分装在1.5mL的EP管中。-20℃冻存备用。

3、柠檬酸缓冲液（50mM，pH4.0）：A溶液：1.0505g柠檬酸溶于50mLddH2O。B溶液：1.4705g柠檬酸钠溶于50mLddH2O。32.75mL A溶液与17.25mL B溶液混匀，再加入50mLddH2O。

4、0.1M PBS（pH=6.0）：13.682.0g NaH2PO4溶于1LddH2O，充分溶解后再加入4.405g Na2HPO4充分溶解。来`自^751论*文-网www.751com.cn

5、50 mL发酵培养基：A溶液：0.1gYNB溶于24 mL PBS（pH：6.0）。B溶液：0.5g葡萄糖溶于25mL PBS（pH：6.0）。将A溶液和B溶液分别在121℃灭菌20分钟，冷却后将A溶液和B溶液混合，再加入1 mL乙酰胺。

 6、2% CMC（ w/v）溶液：称量2g CMC-Na加入80mL柠檬酸缓冲液（50mM，pH4.0），50℃边水浴边搅拌溶解，完全溶解后定容至100mL，储存于冰箱中备用。

 7、玉米秸秆处理[13]：称量10g氢氧化钠充分溶解于1LddH2O中，继续加入200g玉米秸秆粉，搅拌均匀， 121℃灭菌20分钟。将煮沸过的玉米秸秆倒入纱布，用清水反复清洗，直至氢氧化钠被清洗干净，最后用蒸馏水清洗一遍，把水分拧干，储存于冰箱中备用。