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高效液相色谱法测定甘薯花青素含量(2)

时间:2021-07-30 20:37来源:毕业论文
近年来,甘薯花青素的研究热点是花青素的结构、种类、生物合成途径及合成有关的重要酶的结构和基因等,并在实践育种中应用。并且,花青素是一类具

近年来,甘薯花青素的研究热点是花青素的结构、种类、生物合成途径及合成有关的重要酶的结构和基因等,并在实践育种中应用。并且,花青素是一类具有保健功能的生物活性物质,用提取、分离、净化等技术从植物中得到的花青素成分在食品、医药等其他领域中的应用也是目前花青素相关研究的一大热点问题。

根据花青素目前已知的生物合成途径,可以看出甘薯花青素的合成与积累依赖着多种相关酶基因的参与以及协同作用。此外,花青素合成途径中的一系列酶促反应还会受到转录因子的调控[7]。在甘薯花青素的相关研究中,与花青素合成相关的酶基因的表达特性研究仍存在很大的分歧,在不同品种甘薯的不同部位中花青素合成相关酶基因的表达差异性究竟是怎样存在的,哪些关键酶能影响甘薯花青素的合成与积累还有待证实。

中国是目前世界上最大的甘薯生产国。近年来,中国甘薯生产量占世界总产量的80%以上,在中国一些农村地区,甘薯甚至起着当地主食的重要作用[8]。因此,富含花青素的甘薯,因其在世界能源、饲料与粮食作物中的重要用途而倍受人们青睐。

甘薯花青素作为深受大众喜爱的一种天然色素,有关它的营养与保健功能已经在国内外引起了人们的重视。此外,由于国内市场上至今还没有花青素纯品,所以提取高纯度的花青素能够对花色苷类色素的深入研究与开发提供必备的表征条件和理论依据,并且有助于花青素在工业方面的用途。

本实验试图对5种不同品种甘薯的不同部位花青素成分大致分类以及测定各不同品种甘薯花青素的含量,并对其进行比较和分析,以期为今后不同品种的甘薯及其花青素的开发利用以及对甘薯的育种提供初步的理论依据。

2 材料与方法

2.1 仪器与设备

球磨仪;冷冻干燥机;WH-2微型漩涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司);电子分析天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司);KQ-250E型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);Eppendorf 离心机(德国eppendorf公司);Agilent 1100高效液相色谱仪。

2.2 材料与试剂

供试的甘薯品种分为:徐薯32号、徐薯34号、徐薯28号、徐紫薯1号、徐紫薯3号,均由徐州农科院提供。

试剂:盐酸;甲醇(江苏汉邦科技有限公司);乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯;甘薯花青素标准品:24Brix(浓度:78.65mg/L)。

2.3 方法

2.3.1 供试品的制备

新鲜的甘薯样品洗净,分成甘薯块、甘薯叶、甘薯茎,装入干燥的信封中,并用冷冻干燥机冷冻干燥后,再密封在塑料袋中,并在塑料袋中加干燥硅胶待用,放于冰箱中储存待用。

2.3.2 甘薯粉末的制备来!自~751论-文|网www.751com.cn

材料:冷冻干燥后的样品;钢珠(95%酒精浸泡)

步骤:1.将叶片等组织材料干样(磨碎装至半管到1管)和预先浸泡过的钢珠1颗放在2ml离心管中。

2.同时将适配器放在倒有液态的泡沫箱中预冷1min。

3.装有样品的离心管配平放入两个适配器的相同位置。

4.盖上球磨仪的盖子,打开电源,频率调至25.4,时间调成1min。

5.结束后,将离心管从适配器中取出,查看样品研磨状态。(若有需要,可再研30s)

6.将适配器放回原有位置。

Ps.在液氮中预冷适配器要速放速用。离心管要配平,检查适配器是否卡紧。手套用后放回,垃圾需处理。干燥甘薯样品由球磨仪磨成细粉。所有的粉末样品分别装入50ml离心管中,再密封在塑料袋中,并在塑料袋中加干燥硅胶待用。 高效液相色谱法测定甘薯花青素含量(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_79025.html

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