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赖脯胰岛素等电点测定(3)

时间:2021-07-05 20:22来源:毕业论文
0.1%BSA:称取5 mg BSA,溶于5ml双蒸水,备用。 2.2.2试剂配制 A液:称取29.1 g丙烯酰胺和0.9 g亚甲基双丙烯酰胺 ,加入适量双蒸水使其充分溶解,并继续用双蒸

0.1%BSA:称取5 mg BSA,溶于5ml双蒸水,备用。

2.2.2试剂配制

A液:称取29.1 g丙烯酰胺和0.9 g亚甲基双丙烯酰胺 ,加入适量双蒸水使其充分溶解,并继续用双蒸水稀释至 100 ml,用双层滤纸过滤后,避光保存备用。

B液(10%过硫酸铵溶液) :称取100 mg过硫酸铵,加1ml双蒸水溶解临用前配置。

上样缓冲液(2倍浓度): pH 3-10载体两性电解质200 ul;甘油3 ml;双蒸水1.8 ml,混匀备用。  

固定液:称取34.5 g三氯乙酸和10.4g磺基水杨酸,加人适量双蒸水使其充分溶解,并继续用双蒸水稀释至300 ml备用。

脱色液:量取95%甲醇450ml、冰醋酸100 ml、加双蒸水定容至1000 ml,混匀备用。

染色液:称取 0.35g考马斯亮蓝R-250,加入脱色液300 ml,置于60-70℃水浴中加热,使其完全溶解备用。

保存液:量取甘油30ml,加入脱色液300ml,混匀备用。

正极液(1mol/L磷酸溶液):原磷酸试剂的浓度约为16mol/L,故配制时用水稀释16倍即可。

负极液(1mol/L氢氧化钠溶液):称取氢氧化钠4g,加水溶解并稀释至100ml。

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