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培养基发酵程度对热胁迫下果蝇生存率及生殖率的影响(2)

时间:2020-05-26 21:46来源:毕业论文
在相关报道中发现实验之前的果蝇捕捉及实验室培养果蝇的前期有许多问题存在,例如:捕捉果蝇时前几天果皮尚未腐烂时果蝇不会出现,实验室开始培养

在相关报道中发现实验之前的果蝇捕捉及实验室培养果蝇的前期有许多问题存在,例如:捕捉果蝇时前几天果皮尚未腐烂时果蝇不会出现,实验室开始培养果蝇时死亡数量多、繁殖率低等问题,而当捕捉果蝇的果皮腐败时就会有大量的果蝇出现,由此猜想培养基的发酵是否会影响果蝇的生存率和生殖率。本实验就是针对果蝇培养基本身做相关处理,以室外收集的野生果蝇为本次实验的主要材料,探究不同发酵程度的培养基对热胁迫下果蝇生存率和生殖率的影响,以期通过相关数据分析为今后在实验室中能够快速、有效的培养出果蝇提供参考。

1 .实验材料

1.1  实验试剂、用品和材料

试剂:食用玉米粉,活性干酵母,蔗糖,蒸馏水,丙酸(分析纯),琼脂条,乙醚(国产生化试剂);

用品:标签纸,烧杯,广口瓶,玻璃棒,锥形瓶,不锈钢锅,量筒,移液管,电电磁炉,棉花,药匙,纱布等;

实验材料:野生果蝇。

1.2 实验仪器

海尔制造BCD-205STPH冰箱

重庆智飞仪器有限公司DHG303型智能培养箱

乐祺LQ-A30001电子天平

美的C21-WT2112T电磁炉

德国制造81W/A/S2100型电子显微镜

2实验方法

2.1果蝇玉米粉培养基的制备

实验室中常用果蝇培养的培养基配制[9]:

米粉培养基的制备    在150ml蒸馏水中加入4g琼脂条,持续加热直至琼脂条溶化后再加入称量好的14g米粉和20g蔗糖。玻璃棒充分搅拌均匀,煮沸数分钟。放置于室温条件下降低至50°C左右加入2ml丙酸,再次搅拌均匀后分装到培养瓶中,在使用培养基前需要在培养瓶中加入适量的安琪活性干酵母。

玉米粉培养基的制备    

 表1  玉米粉培养基配置

蔗糖     琼脂条      蒸馏水    玉米粉    丙酸    酵母粉

65g       7.5g       1000ml      85g      5ml     15g

玉米粉基础培养基的配制方法如表1所示。将650ml的蒸馏水倒入不锈钢锅中加热。水煮沸后,将之前称量好的65g蔗糖、7.5g琼脂条加入沸水中,搅拌至蔗糖和琼脂条溶化;量取200ml蒸馏水倒入烧杯中,在烧杯中倒入之前称量好的85g玉米粉,不停搅拌成玉米糊状,再将搅拌完成的玉米糊倒入不锈钢锅中;量取150ml蒸馏水倒入烧杯,用玻璃棒搅拌,冲刷烧杯内壁上剩余的玉米糊后也将其倒入锅中煮沸;将盛有培养基的不锈钢锅在室温下放置,冷却至50°C左右加入称量好的15g安琪活性酵母粉并搅拌均匀,随后加入5ml丙酸搅拌即为玉米粉培养基。

香蕉培养基的制备    将成熟的香蕉捣碎后搅拌成大约55克的香蕉浆,将1.7g琼脂条加到50ml的煮沸的蒸馏水中,搅拌直至琼脂条溶化后加入香蕉浆,搅拌均匀。继续煮沸6分钟左右,在室温下放置直至温度降低至约50°C后加入1ml的丙酸以防止培养基霉变,充分搅拌均匀后分装于广口瓶中。在使用培养基前需要在培养瓶中加入适量的安琪活性干酵母。

本实验使用玉米粉培养基,通过统计不同发酵程度下果蝇的存活数量,观察不同发酵程度下果蝇的繁殖能力,确定不同发酵程度下对果蝇生存及生殖能力的影响。

将配置好的玉米粉培养基倒入广口瓶中(每个培养瓶中培养基的质量为70g左右),敞口冷却后将玉米粉培养基在30℃的培养箱中发酵24h,36h,72h,另外一组不发酵的培养基作为空白对照组,发酵程度不同的培养基要有3个重复组,对照组也是如此,每个培养瓶上贴上标签,并注明培养基的发酵时间。 培养基发酵程度对热胁迫下果蝇生存率及生殖率的影响(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_52938.html

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