传统的桂花繁殖技术存在繁殖周期长、繁殖速度慢、成活率低等问题,同时还受到季节、气候、地理条件等因素的制约。目前桂花在育种方面较为落后[2]。主要体现在品种数量少、育种方法单一,并且现存品种都有一定的局限性,金桂虽然香最浓但花期短,仅8-9天,其美化、香化功能受到了一定影响;而四季桂虽花期长但香不足。另外,桂花的叶色单一,还没有具彩叶的桂花品种;抗寒能力弱,长江以北难以栽培。所以,为了满足人们对桂花优良栽培品种的需要,如何培育出花期长、彩叶、抗寒能力强的桂花新品种是今后桂花育种中的长期课题。但是桂花是木本植物,童期较长,若采用常规的杂交育种方法,将很难达到目的,所以,需利用现代生物技术来培育桂花新品种,提高育种效率。
根据细胞全能性学说,植物体内所有活的植物细胞都具有全能性,能通过胚胎发生或器官发生途径发育成完整的植株。植物组织培养不仅能使处于分生状态的细胞继续保持分裂能力,同时也可以使组织分化的细胞恢复分裂能力。其脱分化和再分化的过程主要通过培养基中添加的生长调节物质调节的,其中以生长素和细胞分裂素的应用最为广泛。[3]
组织培养可以通过适宜桂花胚状体诱导的激素组合,为建立桂花遗传转化体系,利用转基因方法改良桂花性状奠定基础,从而克服传统繁殖方法中存在的一系列问题,并且它还具有节省成本、空间资源、繁殖速度快、流水线生产等优点,使得具有优良性状(抗冻、花期长)或者新性状(蓝色花色、彩色花色)的桂花得到培育。
外植体的选择对于植物的组织培养非常重要。不同外植体对离体培养的反应是不同的,因而培养的效果也就不同。实际上,同一植株的不同器官、组织或其他材料,以及植株的年龄、生理状态及取材季节甚至天气状况等,都会直接或间接地影响离体操作和培养工作的成败。
近年来,在对桂花组织培养的研究中,不难发现,研究者通常采用茎尖、带芽茎段、胚、嫩叶、花芽等部位。目前,桂花组织培养相关报道也主要集中在桂花茎段、茎尖和胚培养上。
秦新民用带嫩芽的幼嫩茎段成功诱导了桂花丛生芽的产生[4]。袁王俊通过对休眠芽、萌动芽和嫩枝的茎尖外植体的培养,获得了最佳的取材时间和培养条件[5]。宋会访等通过对茎段、叶片、胚和新梢茎段的培养,确定了桂花离体培养与快速繁殖体系的最佳培养条件[6]。李林等以潢川金桂的嫩枝茎尖为外植体,确立了桂花组培快繁体系的最佳条件[7]。吕志鹏以金桂茎段为试验材料,采用正交试验设计方案,探讨大量元素和不同生长调节物质对金桂诱导、增殖以及生根过程中的影响。马燕[8]等对大花金桂、籽银桂、籽丹桂进行幼胚的离体培养,研究了不同消毒时间、基本培养基及生长调节剂组合对离体幼胚萌发的影响,以及不同培养条件和培养基配方对萌发苗生根的影响并确定了适合幼胚萌发的适宜培养基。韩瑞超[9]、邓黎[10]、袁王俊[11]等以桂花幼胚为材料进行组培,确定诱导胚萌发的理想体系。梁茂厂[12] 以当年生幼嫩枝条、无菌苗茎段和胚为外植体的无菌短枝扦插再生途径的组织培养技术研究和以叶片、胚为外植体的愈伤组织发生途径的组织培养技术研究。何钢[13]以金狮桂为材料,采取幼年型材料中下部饱满的腋芽茎段或成年型顶端的芽茎段作为外植体诱导丛生芽。刘萍[14]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。刘有全[15]等分别以不同桂花品种的种子为材料进行离体萌发实验,明确了桂花种子的最佳萌发条件。 大花金桂子叶胚乳切块培养再生苗的研究(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_50511.html