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过表达mTIR1影响拟南芥盐胁迫耐受性的研究(3)

时间:2020-01-14 20:13来源:毕业论文
⑥将含有去除休眠后种子的培养皿置于16 h光照/8 h黑暗的条件下放置培养论文网。光照强度是4000 lx,恒温22~24 ℃,恒湿60%。对子叶颜色转为绿色的进行统计

⑥将含有去除休眠后种子的培养皿置于16 h光照/8 h黑暗的条件下放置培养论文网。光照强度是4000 lx,恒温22~24 ℃,恒湿60%。对子叶颜色转为绿色的进行统计,间隔一天统计一次,每组实验重复3遍。

1.1.4 盐胁迫下幼苗根的生长情况统计

①将适当的拟南芥种子置于1.5ml的离心管中,1 ml 70%酒精混匀3 min,并小心吸除。

②1.5 ml 10% NaClO混匀10 min后吸除。

③无菌水1 ml洗种子4~5遍,每次清洗时要吹。

④第四次时加入1.5 ml无菌水静置8 min,-751^文'论"文.网www.751com.cn吸出后再水洗1~2遍。

⑤剩少量水,用灭菌的1 ml移液器将表面消毒后的种子点在分别含NaCl(0 mM,100 mM,150 mM,200 mM)的新鲜培养基上进行培养。每个株系80颗种子,透气胶带封口后置于4 ℃的冰箱中春化2 d,破除种子休眠。

⑥将含有去除休眠后种子的培养皿置于16 h光照/8 h黑暗的条件下放置培养。光照强度是4000 lx,恒温22~24 ℃,恒湿60%。

⑦将生长5d的幼苗移到分别含NaCl(0 mM,100 mM,150 mM)的新鲜培养基上进行培养,每个株系30棵幼苗,每3d统计一次根的生长状况。

⑧在含盐培养基上生长9d后,对幼苗拍照,每组实验重复3次。

1.1.5盐胁迫下土培苗生长状态统计

①将适当的拟南芥种子置于1.5ml的离心管中,1 ml 70%酒精混匀3 min,并小心吸除。

②1.5 ml 10% NaClO混匀10 min后吸除。

③无菌水1 ml洗种子4~5遍,每次清洗时要吹。

④第四次时加入1.5 ml无菌水静置8 min,吸出后再水洗1~2遍。

⑤剩少量水,用灭菌的1 ml移液器将表面消毒后的种子点在分别含NaCl(0 mM,100 mM,150 mM,200 mM)的新鲜培养基上进行培养。每个株系80颗种子,透气胶带封口后置于4 ℃的冰箱中春化2 d,破除种子休眠。

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