高盐环境是一种极端环境，中度嗜盐菌是在含0.5-2.5mol/L(3%-15%)盐浓度的培养基上生长最好的菌株[4-5]。嗜盐菌常存在于盐湖、海洋、盐场、盐碱地土壤、腌制食品卤水中等，嗜盐菌适应环境能力强，具有特殊的嗜盐机制和生理生化特性，近年来被学者研究较多，其应用前景非常广泛，目前在嗜盐机理、分类学地位、相容性溶质、分子鉴定、以及环境污水治理、酶制剂生产、食品工业、医药行业等领域已展开研究[6]。嗜盐菌可以在高盐环境中存活比较好，是因为其抗渗透压的能力很强，主要是因为嗜盐菌可以产生或积累小分子相容性物质，如糖类、氨基酸、甜菜碱类、四氢嘧啶等，维持分子表面的结合水，从而使菌体对渗透压适应性提高来适应高盐环境。

16S rRNA基因由于其高保守性和特殊性在基因序列比对分析中应用非常广泛，并且其在细菌中普遍存在[7]，是细菌分子鉴定较好的方法。伴随着分子生物学的发展，以16S rRNA基因检测为主的多相分类在嗜盐菌分类鉴定上得到了广泛应用，此检测方法快速、高效、准确[8]。16S rRNA基因长度大约为1500bp，其可以根据序列相似性判断菌株的种属分类，其序列保守性和独特性使16S rRNA基因分析法成为鉴定细菌的一种有效方法^751`文~论!文'网www.751com.cn。

本文选取牛蒡榨菜腌制后期卤水作为水样，此卤水是一种特殊高盐环境，为极端环境，从中最终分离鉴定出一株中度嗜盐菌，NJ3，与弯曲假单胞菌（Pseudomonas geniculata）序列相似性非常高，为99.51%。经过实验，观察其形态学特征，判断其革兰氏阴阳性，进行16S rRNA基因PCR扩增，对得到的16S rRNA基因序列进行比对分析，确定其分类学地位，对其进行系统发育学分析，丰富嗜盐菌分类的多样性，有利于发现新种属、增加微生物种类，为嗜盐菌的鉴定奠定基础；了解此菌的致病性，为腌制牛蒡食品安全提供保障[9]；测定不同盐浓度对NJ3的影响，了解其最适生长盐浓度，有利于为控制好腌制后期卤水的盐浓度提供参考论文网，使其既不影响榨菜风，又不对人体造成伤害。

1材料与方法

1.1材料与试剂

1.1.1 水样

用无菌玻璃瓶装取牛蒡榨菜厂腌制后期的卤水样品，置于4 ℃冰箱保存。

1.1.2培养基配方

10%盐浓度固体培养基：酵母膏5g，蛋白胨3.75g，柠檬酸三钠1.5g，氯化钠50g，氯化钾1g，硫酸镁5g，琼脂粉10g，蒸馏水500mL，PH 7.4，121℃灭菌25min后备用。

10%盐浓度液体培养基：酵母膏5g，蛋白胨3.75g，柠檬酸三钠1.5g，氯化钠50g，氯化钾1g，硫酸镁5g，蒸馏水500mL，PH 7.4，121℃灭菌25min后备用。