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甲基托布津降解菌的选育及鉴定(3)

时间:2019-09-24 12:53来源:毕业论文
葡萄糖粉 AR. 河南百创生物科技有限公司 明胶粉 95% 苏州臻豪化工科技有限公司 蔗糖 99% 郑州天健科技有限公司 表2.主要试验仪器 Table2. The test instrument 名


葡萄糖粉               AR.                河南百创生物科技有限公司
明胶粉                 95%                苏州臻豪化工科技有限公司
蔗糖                   99%                郑州天健科技有限公司
表2.主要试验仪器
Table2. The test instrument
名称                    型号                    生产厂商
电子天平                 AR124CN                上海奥豪仪器有限公司
恒温培养摇床              ZHWY                  南京晓晓仪器设备有限公司
恒温培养箱               LRH系列                北湖仪器设备有限公司
洁净工作台               SW-CJ-FD                深圳市公明百净机电设备厂
高压蒸汽灭菌锅            LDZX                  特斯特检测仪器公司
离心机                   HC-3018                 张家港市离心机制造厂
紫外分光光度计           TU-1810                  长沙秋龙仪器有限公司

1.2 土壤样本采集
     于2015年3月下旬,在周口市川汇区施用过甲基硫菌灵的蔬菜园中,采集距离地表约15厘米的土壤样本5份,放入环保纸袋中,编号标注时间、地点。筛除非土壤成分后将样品装入棕色瓶中并标记,放入4℃冷藏箱保存备用。
1.3 培养基配制
基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO4 1.0g,MgSO4•7H2O 0.2g,NaCl 0.4g, NH4NO3 1.0 g,蒸馏水1L。
LB培养基:蛋白胨5.0g,酵母提取物2.5g,氯化钠2.5g,蒸馏水500L。
生理生化试参考文献[22]方法。
以上培养基在使用前须经过121℃或115℃(灭菌温度视具体培养基而定)20min灭菌。
1.4菌种分离与纯化
    从5份土壤样品中各称取5g土壤,分别加入到100mL中含甲基托布津100mg/L的无机盐培养基,编号并注明时间。将5份培养液放入35℃、120r/min的恒温培养摇床中培养3d,培养结束后按10%的接种量接种到新鲜配置的无机盐培养基中,并逐步加大甲基托布津的用量直到每份含量为500mg/L停止。
     将5份驯化后的培养液用平板划线法接种到LB固体培养基上并分别做一组平行对照,放入35℃生化培养箱中培养24h后发现有3份长出菌株,其余两份没有任何菌株生成。把这3份菌株分别命名为ZY01、ZY02、ZY03,并用斜面保存法于4℃冰箱中保存菌种,标明编号、日期。 甲基托布津降解菌的选育及鉴定(3):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_39703.html
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