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芽孢杆菌D1菌株的基因组测序和突变株基因文库构建(2)

时间:2019-06-01 09:24来源:毕业论文
有些厌氧微生物利用苯甲酰-CoA的还原途径降解4HBA。这个途径的第一步是CoA连接酶(CoA ligase)把4-羟基苯甲酸转化成4-羟基苯甲酰-CoA(4-hydroxybenzoyl-CoA)。


有些厌氧微生物利用苯甲酰-CoA的还原途径降解4HBA。这个途径的第一步是CoA连接酶(CoA ligase)把4-羟基苯甲酸转化成4-羟基苯甲酰-CoA(4-hydroxybenzoyl-CoA)。然后,4-羟基苯甲酰-CoA还原酶(4-hydroxybenzoyl-CoA reductase)将4位的羟基去掉生成苯甲酰-CoA(benzoyl-CoA)。苯甲酰-CoA的降解是逐步还原苯环的双键生成2-氧环己甲酰-CoA(2-oxocyc lohexanecarboxyl-CoA),然后开环生成pimelyl di-CoA,最后进入三羧酸循环[6]。
芳香族化合物的降解过程中,芳香环的开环是一个重要步骤
紫外光线照射:UV照射主要引起点突变,较少引起染色体突变。分子突变不是紫外光线的直接光化作用,而是生物进行修复的时出现的顺序错误。由于每一修复时间出现错误的几率很小,所以若想获得经紫外线照射产生的基因突变,必须做大量的实验统计。
经紫外线最适时间照射过的突变芽孢杆菌菌株即构成了基因文库,对此菌株进行筛选,筛选出高产量的突变菌株,并进行冷藏保存。
1 材料与方法
1.1菌株材料
D1菌株为本实验室保藏菌株
1.2主要试剂
1.2.1生化试剂与分子生物学试剂
(1) 酶类
Taq DNA聚合酶:上海生工生物科技有限公司
蛋白酶K(10 mg/ mL):用超纯水配成10 mg/mL,-20℃保存
溶菌酶(10 mg/mL):用超纯水配置成10 mg/mL,-20℃保存 芽孢杆菌D1菌株的基因组测序和突变株基因文库构建(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_33963.html
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