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基于外切酶反应和氧化石墨烯荧光检测碱性磷酸酶的活性(3)

时间:2017-06-07 15:17来源:毕业论文
2 结果与讨论 2.1 实验原理与探针设计 图1.基于GO和 exo酶切检测CIP的原理示意图 实验原理如图1所示,实验中我们设计了两条DNA探针(P1,P2),其中P1的5末端标


2 结果与讨论
2.1 实验原理与探针设计
   图1.基于GO和λ exo酶切检测CIP的原理示意图
实验原理如图1所示,实验中我们设计了两条DNA探针(P1,P2),其中P1的5'末端标记有磷酸基团,P2的5'末端标记有荧光基团, 两者退火杂交后形成一端荧光基团一端磷酸基团的双链DNA。无目标ALP(CIP)存在时,λ exo降解双链DNA中的末端磷酸化的P1,释放荧光基团标记的P2,加入GO吸附P2并猝灭其荧光,得到较弱的背景荧光。当CIP存在时,CIP水解5'末端的磷酸根,生成5'-羟基末端,发生去磷酸作用的双链DNA不能被λ exo有效酶切,加入GO由于GO与双链DNA结合力较小,仍可观察到较强的荧光信号。荧光信号的减小程度跟目标CIP的浓度成正比,通过检测荧光信号的变化可实现对目标CIP活性的检测。 基于外切酶反应和氧化石墨烯荧光检测碱性磷酸酶的活性(3):http://www.751com.cn/huaxue/lunwen_8641.html
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