2.3 实验步骤

本文以徐州市国祯污水处理厂的脱水污泥为实验材料，实验分三组，一组为空白对照组（不添加外源菌剂），另两组添加恶臭假单胞菌和食苯芽孢杆菌两种外源菌剂，分别在20 ℃和30 ℃条件下进行好氧发酵。在发酵前（0 d）、发酵中（12 d、24 d）和发酵后（30 d）取泥样冷冻干燥，即用锡箔纸包裹放入冰箱冷冻后，再放入冻干机中干燥。干燥结束后打开锡箔纸，将污泥放入玛瑙研钵中研磨，直至能全部通过100目尼龙筛，然后装入离心管混匀后备用[6]。

用BCR连续提取法对污泥中重金属的各形态进行提取，提取步骤如下：

(1) 酸可交换态提取

称取约2.0 g 干污泥样品放于100 mL聚乙烯离心管，加入40 mL 0.1 mo/L的醋酸后，放入恒温振荡器中室温振荡16 h。震荡结束后，放入转速为4000 r /min的离心机中离心20分钟。上层清液用定量滤纸过滤，滤液移入50 mL聚乙烯离心管中，加入0.4 mL浓硝酸，定容至45 mL。残留物用10 mL去离子水冲洗，在转速为4000 r /min离心机中离心20 min后，倒掉洗涤液。

(2) 易还原态提取

于上一级残渣中加入40 mL 0.1 mol /L经0.1 mol /LHNO3 酸化后pH值为2的盐酸羟胺，室温下震荡16 h。其他步骤同前。

(3) 可氧化态提取

将上一级残渣移入锥形瓶中，加入10 mL体积分数为30%的8.8 mol /L的双氧

水，置于25 ℃的电热恒温水浴锅中水浴加热1 h，再向其中加入10 mL8.8 mol /L的双氧水，于85 ℃水浴中1 h，蒸发至近干后取出并冷却至室温。然后再加入50 mL 1 mol /L经HNO3 酸化后pH=2的NH4AC，室温下振荡16 h，其他步骤同前。来!自~751论-文|网www.751com.cn

(4) 残渣态提取

将上一级残渣移入100 mL 烧杯中，放入烘箱烘干后称取0.2 g污泥于聚四氟乙烯密封微波消解罐中，加入2 mL HCl、8 mLHF和10 mLHNO3，静置20 min后拧紧外盖并放入微波消解仪的转盘上。在120 ℃下消解5min，180 ℃下消解30 min，120 ℃消解5 min，消解结束后，冷却30 min。然后在通风柜中赶酸20 min，用体积分数2%的硝酸洗涤消解罐3次，将消解液和洗涤液合并于100 mL离心管。在4000 r /min离心机中离心30 min后再用定量滤纸过滤残渣，滤液移至50 mL离心管，用2%硝酸溶液定容至45 mL[7~8]。

提取结束后，用原子吸收分光光度法测量重金属Zn、Ni、Cu、Cr、Cd 在各个形态下的吸光度值，用原子荧光法测量Hg、As、Pb三种重金属在各个形态下的荧光值，最后计算得到不同形态下的重金属含量。随后依据公式：

，算得其有效性。