氯金酸（上海试剂厂），poly(2-ethyl-2-oxazoline)(PEOZ)（天津希恩思生化科技有限公司），MSA（2-巯基丁酸 C6H4O4S 东京化成工业株式会社 AR），二水合柠檬酸三钠（国药集团化学试剂有限公司 AR），实验均用二次蒸馏水（Thermo SCIENTIFIC）,试剂均为分析纯。
2 金纳米球的合成
采用晶种生长法合成金纳米球
A.金纳米球种子的合成
将50 mL 2.5×10-4 mol/L HAuCl4油浴加热煮沸，加入1.75 mL 1%柠檬酸钠煮沸30 min后，撤掉油浴锅，冷却至室温。
B.金纳米球的生长
4个100 mL锥形瓶加入0.8 mL 5×10-3 mol/L  HAuCl4和（3.0 mL、0.48 mL、0.12 mL、0.05 mL）15.3 nm金纳米球种子，混合至50 mL，再加入0.24 mL 0.01 mol/L MSA，快速强烈搅拌，过2 h左右，观察其颜色至不再变化，停止搅拌。
3 梯度离心法分离金纳米球
配置质量比为5%、7.5%、10%的PEOZ(MW=200000 g/mol)浓度梯度，依次加入1 mL 10%、7.5%、5%溶液至离心管中，然后静止2-3 min，使每层媒介均匀稳定，有明显的分层现象，然后加入1 mL金纳米球溶液。将离心管移入离心机中，设置转速为5500 g，每5 min观察、记录现象。图2-1中10 min即可得到明显的分层。
将分层好的样品从离心机取出后静止数分钟，然后用注射器分别吸取每层中的样品至离心管中，加入相同体积的二次水，采用6000 g转速离心10 min，取出相同体积的上层清液，以除去过多的PEOZ，重复两次，然后进行表征。
由于离心管中的溶液用注射器不容易操作，就提出了以下设想。就是换一种容易切割的离心管，离心完成后，不用注射器把每一层都吸出来，而是静置一段时间，放入冰箱冷冻，让样品结冰。这样样品溶液就成了固体，把离心管切开取出里面的固体，让后一层层的切开，可以得到比较理想的分离层。可以把每一层放在载玻片中，做扫描电镜。
4 金纳米球的表征
分离提取出的金纳米球溶液通过两次洗涤除去多余的PEOZ之后，超声20-30 min，然后利用移液枪对每层分别提取100 µL溶液至微量比色皿中，通过紫外-可见光光谱分析，研究其光学性质。
超声之后的金纳米球溶液，利用镊子夹住碳膜铜网，用移液枪向铜网上滴加溶液，在室温环境下让其自然蒸发，视溶液浓度重复滴加2-3滴，然后利用透视电镜(TEM)进行尺寸表征。
结果与讨论
从表1中可以看出金纳米球种子的波长最短，吸光度最大。合成的金纳米球随着加入的金纳米种子的减少，吸收波长增加，吸光度变小。说明随着加入种子的减少，合成的球粒径变大，数量减少。在图1-1(a)中看以清晰的看到不同的颗粒（或粒径）大小的金纳米球具有不同的颜色，如果金纳米球溶液中的浓度低， 高聚物(PEOZ)金纳米球的分离(2):http://www.751com.cn/huaxue/lunwen_40422.html