1.前神经元发育中lmo4b起作用的2个时期。

我们认为本文中的lmo4b玛琳注射的表型反映了lmo4b活性是早期前脑及眼睛发育的必要条件。我们发现在3体节的后萌芽阶段，lmo4b最先在前神经边界区域表达，并且在非神经外胚层(Fig. 4G).分开之前与zic1基因开始出现重叠表达(Figs. 4D and E)。我们认为lmo4b的活性会在神经边界减弱相关神经基因的表达，因而会通过影响神经元的命运而限制细胞数目。为支持这个假设，提高lmo4b的水平并不会干扰six3b在神经板扩张表达的能力，因而表明在边界上lmo4b主要功能是抑制six3b的翻译过程。这意着在1体节时期的边界具有一定的可塑性，并且只对边界的固定位置起作用，而不是对边界的自身形成起作用。为支持这个解释，dlx3基因会在玛琳注射的胚胎中表达，并且基板衍生结构也出现在玛琳注射的胚胎中（未显示）。

我们的结果与边界形成的可能性一致，lmo4b在前神经组织形成时期的神经组织中为了保持前神经细胞的高增殖状态而调节six3和rx3基因的表达是必需的。Lmo4b起作用的第二个时期，在6体节时期可观察到lmo4b在整个神经组织中均表达，并且提高lmo4b的活性会抑制独立于six3基因的rx3基因的表达。Rx3是眼睛囊泡扩张和发育所必需的(Kennedy et al., 2004; Loosli et al., 2003; Loosli et al.,2001; Rembold et al., 2006; Rojas-Munoz et al., 2005; Stigloher et al., 2006),，并且一旦rx3表达(Carl et al., 2002).，便会抑制six3的功能，对两个进程都产生干扰(Carl et al., 2002; Lagutin et al.,2003)。这表明提高lmo4b会抑制six3b在眼睛的作用，而这与lmo4b限制rx3的表达作用与它在six3翻译上的作用无关的结论相符，同时lmo4b也可能直接与six3b蛋白或其他被six3调节的蛋白结合而干扰six3b蛋白质的功能。在眼部及眼睛囊泡表达和扩张的时候对rx3表达的调节可能有助于确保有些分裂及时结束和神经前体细胞的分化。这个模型的细节在Fig.9。另一个可能性是这两个进程均需要six3b不同水平的活性，而我们的实验在眼部并没有提供足够的six3b来克服lmo4b过表达产生的影响。

在果蝇及哺乳动物组织培养中的实验表明，LMO蛋白通过专一的与DNA结合蛋白作用而调控翻译。我们的实验并没有指明lmo4b是否直接调控six3b或rx3的表达。然而，我们发现前神经边界区域lmo4b表达后，lmo4b功能短暂缺失的作用开始产生，这表明前神经元基因的早期表达调控最接近显示了lmo4b的活性。我们注意到不能通过适当的减小six3a和six3b的活性而减轻lmo4b玛琳注射后产生的表型，这表明lmo4b缺失产生的一些作用与six3a和six3b无关。类似于six7(Drivenes et al.,2000)等一些多余的基因或被lmo4b平行调控的其他一些早期前神经元基因能解释six3独立于lmo4b功能的现象。

2.下丘脑的发育依赖lmo4b的调节。

我们的结果表明：受精后28小时时下丘脑原始细胞的大小与lmo4b活性是呈相反的关系。Six3对于下丘脑特化及生长的必要性还未被披露，我们的实验中也未发现。与此相反的是，rx3是受lmo4b负调控并在下丘脑表达的一个基因，并且rx3的缺失会导致下丘脑及端脑的扩大(Stigloher et al., 2006).。然而，受lmo4b负调控的rx3并不能解释lmo4b在下丘脑发育中的作用，不过这可用来预测lmo4b活性与下丘脑大小间的一个直接关系。此外，在lmo4b抑制及过表达胚胎的下丘脑中并没有看到rx3表达不成比例的改变。我们认为lmo4b的作用与下丘脑的大小间可能是间接关系。我们认为lmo4b也在分节期的前腹侧中线组织中表达(Lane et al., 2002),，并且这些组织与下丘脑的诱导发育模式相关。

3.LMO4的一个新功能。

哺乳动物LMO4在乳腺上皮细胞及神经管中具有高增殖活性的细胞中表达(Sum et al., 2005b)，并且在这些组织中通过RNA干扰(Sum et al., 2005a)或基因敲除技术(Lee et al., 2005; Tse et al., 2004)产生的LMO4活性丧失与增殖活性减弱有一定的相关性，这也就表明LMO4会促进细胞增殖。我们的研究表明斑马鱼lmo4b在前神经组织通过对six3b和rx3表达的负调控可间接限制细胞增殖。我们认为LMO4并不是一个专门调控细胞增殖的作用因子，但对其细胞增殖的作用是环境依赖的，并且其蛋白质的功能受LMO4，基因表达及蛋白质与蛋白质间的相关作用调控；为支持这个说法，一项Setogawa et al.(2006)的最近研究表明人类LMO4能在某些环境中诱导表达并抑制细胞增殖。 斑马鱼LMO4同源基因英文文献和中文翻译(6):http://www.751com.cn/fanyi/lunwen_50722.html